Responsable: Pablo González-Melendi de León - Profesor/a Titular de Universidad

pablo.melendi@upm.es 910679169 Ext:79169 / 910679107 Ext:79107 ( Lab Microscopía )

 

Personal:

González Carneros, Carlos - Técnico/a


Buzón de quejas, sugerencias y felicitaciones


Carta de servicios


 
El servicio de microscopía es miembro de:

Red Española de Microscopía Óptica Avanzada (REMOA)

Plataforma de Microscopía para Biociencias. Red de Laboratorios e Infraestructuras de la Comunidad de Madrid

 

 

 

Microscopio confocal invertido Leica TCS-SP8

 

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Microscopio confocal vertical con superresolución Zeiss LSM 880 con fast Airyscan

 

Equipamiento disponible

 

Microtomos y preparación de muestras
  1. Microtomo de rotación Leica HistoCore NANOCUT R
  2. Vibratomo Leica VT1200 S
  3. Dispensador de parafina Leica EG 1110
  4. Horno de hibridación Amersham
Microscopios 
  1. Microscopio vertical Zeiss Axiophot [Imágenes]
  2. Microscopio invertido Leica DM IRB
  3. Microscopio de fluorescencia Leica DM2000 
  4. Estereomicroscopio Leica MZ10 F
  5. Estereomicroscopio Olympus SZX9
  6. Estereomicroscopio Leica MZ95
  7. Microscopio Vertical Nikon Labophot-2
Microscopía confocal: 
  1. Microscopio confocal espectral Leica TCS-SP8 [Imágenes]
  2. Microscopio confocal con superresolución Zeiss LSM 880 con fast Airyscan
Cámara CCD 
  1. Cámara CCD NightOwl LB 983 NC100. Berthold
Equipamiento de captación de imágenes de alta sensibilidad (FlumaZone) 
  1. Microscopio estereoscópico LEICA M205FA para fluorescencia y bioluminiscencia
  2. Cámara digital de muy alta sensibilidad de ganancia en chip Hamamatsu ImagEM X2 EM-CCD
  3. Metamorph para la adquisición, integración y análisis de imágenes
Microscopio de fluorescencia motorizado con cámara de alta sensibilidad 
  1. Microscopio invertido Leica DMi8
  2. Cámara digital Hamamatsu ORCA Flash 4.0 LT

 

El programa Fiji para análisis y procesado de imágenes se puede descargar pinchando Aquí.

 


Microtomo de rotación Leica HistoCore NANOCUT R
  1. Modo de trabajo automático o manual.
  2. Control mediante un panel ergonómico e independiente.
  3. Portamuestras para inclusiones en parafina y resinas.
  4. Base para cuchillas de acero desechables y de diamante.
  5. Espesor mínimo de las secciones de 0,5 µm.
  6. Portamicroscopio integrado.

 

 

 

 

Vibratomo Leica VT1200 S

  1. Para cortar secciones gruesas de muestras sin incluirpor vibración de la cuchilla (Gillette).
  2. Modo de trabajo automático o manual.
  3. Panel de mandos independiente.
  4. Lupa integrada.

Dispensador de parafina Leica EG 1110

Horno de hibridación Amersham

 

 

  • Filtros para fluorescencia:

Luz de excitación

Filtro de excitación

Espejo dicroico

Filtro de emisión

ultravioleta

BP 365

395

LP 397

azul

450-490

510

LP 520

verde

BP 546

580

LP 590

 

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Técnica

Inmersión

Plan-NEOFLUAR

2.5x/0.075

 

 

Plan-NEOFLUAR

5x/0.15

 

 

Plan-NEOFLUAR

10x/0.3

 

 

Plan-NEOFLUAR

20x/0.5

DIC*

 

Plan-NEOFLUAR

40x/0.75

DIC*

 

Plan-NEOFLUAR

40x/1.3

contraste de fase

aceite

Plan-NEOFLUAR

63x/1.25

 

aceite

Plan-NEOFLUAR

100x/1.3

 

aceite

 

*DIC: contraste diferencial interferencial

 

La captura de imágenes se realiza con una cámara CCD color Leica DFC 300F (1,4 Mpixels.)

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Técnica

Inmersión

E PLAN

10x/0.25

BF 

 

E PLAN

40x/0.65

BF

 

E PLAN

100x/1.25

BF

aceite 

 

  • Filtros para fluorescencia:

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Espejo dicroico

Filtro de emisión

A

ultravioleta

BP 340-380

400

LP 425

I3

azul

BP 450-490

510

LP 515

N2.1

verde

BP 515-560

580

LP 590

 

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Técnica

Inmersión

PL FLUOTAR

1.6x/0.05

 

 

C PLAN

4x/0.10

 

 

C PLAN

10x/0.22

contraste de fase

 

N PLAN

20x/0.40

 

 

N PLAN

40x/0.55

contraste de fase

 

N PLAN

100x/1.25

contraste de fase

aceite

 

  • La captura de imágenes se realiza con una cámara color CMOS DC.20000i euromex (20 Mpixels).

 

  1. iluminación diascópica y episcópica
  2. objetivo planapocromático 1.0x/0.125
  3. aumento del portalentes 0.8x – 8x
  4. filtros para fluorescencia

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Filtro de emisión

UV

ultravioleta

360/40

420

GFP Plus

azul

460-500

510

GREEN

verde

546/10

590

 
La captura de imágenes se realiza con una cámara CCD color Leica DFC 400C (5 Mpixels.)

 

  • Filtros de fluorescencia:

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Espejo dicroico

Filtro de emisión

A

UV

BP 340-380

400

LP 425

L5

blue

BP 480/40

505

BP 527/30

N2.1

green

BP 515-560

580

LP 590

 

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/Apertura numérica

Técnica

Inmersión

C PLAN

10x/0.22

 

 

C PLAN

20x/0.4

Contraste de fase

 

C PLAN

40x/0.65

Contraste de fase

 

HI PLAN

63x/0.75

 

 

C PLAN

100x/1.25

 

Aceite

 
La captura de imágenes se realiza con una cámara CCD color Leica DFC 300FX (1,4 Mpixels).
  1. Iluminación episcópica
  2. Objetivos 0.5x y 1.0x
  3. Aumento del portalentes 0.63x – 5.7x
  4. Bloques de filtros para fluorescencia

 

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Filtro de emisión

UV

ultravioleta

400-440

475

GFP

azul

460-490

510

  1. Iluminación episcópica
  2. Objetivo PLAN 1.0x
  3. Aumento del portalentes 0.63x – 6x

 

Captura imágenes de bioluminiscencia, quimioluminiscencia y fluorescencia (filtro para GFP).
  1. resolución 1024 x 1024 px
  2. rango de sensibilidad de 300 a 1050 nm
  3. eficiencia cuántica (QY) del 90% a 620 nm
  4. rango dinámico de 82 dB

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

  1. panel externo para el control y manejo de todas las funciones motorizadas
  2. iluminación episcópica mediante dos guías de luz semirrígidas con lámpara de LED
  3. base de luz transmitida con tres tipos de iluminación: campo claro, contraste de Rotermann y campo oscuro
  4. objetivo apocromático 1X: apertura numérica 0,17 y distancia de trabajo 61,5 mm
  5. objetivo apocromático 2X: apertura numérica 0,35 y distancia de trabajo 20,1 mm
  6. zoom motorizado con aumento variable entre 0,78X y 16X (rango total 20,5)
  7. ruta de fluorescencia motorizada
  8. Filtros para fluorescencia:

 

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Filtro de emisión

DAPI

ultravioleta

350/50

460/50

GFP

azul

470/40

525/50

mCherry

verde

560/14

630/75

 

Características:

  1. Sensor CMOS FL-400
  2. Número de pixels: 2048 x 2048
  3. Área efectiva: 13,312 mm x 13,312 mm
  4. Velocidad: 30 frames/s a máxima resolución
  5. Eficiencia cuántica (QY) > 70% at 600 nm
  6. Binning digital 2x2 / 4x4

 

Consta de los siguientes elementos:

 

  1. Pantalla táctil integrada en el estativo para el control de todas las funciones del microscopio

  2. Iluminación CoolLed pE300 ULTRA

  3. Autofoco Leica AFC (Adaptive Focus Control)

  4. Filtros para fluorescencia:

     

Tipo

Fluorocromo

Filtro de excitación

Espejo docroico

Filtro de emisión

LED 405

DAPI, BFP

405/60

455

470/40

FITC/TXR

CFP, GFP

mCherry

455/50

560/40

495

595

520/40

635/65

 

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Inmersión

Cubreobjetos (mm)

Técnicas *

HC PL Fluotar

5x/0.15

 

 

BF, Pol, DIC, FLUO

HC PL Fluotar

10x/0.32

 

0.17

BF, Pol, DIC, FLUO

HC PL Fluotar

20X/0.55

 

0.17

BF, Pol, DIC, FLUO

HC PL Fluotar

40x/0.80

 

0.17

BF, Pol, DIC, FLUO

HC PL APO

63X/1,40

aceite

0.17

BF, FLUO


*BF = campo claro, DIC = contraste diferencial interferencial, Pol = Polarización, FLUO = Fluorescencia

 

Platina motorizada XY:

  1. max. velocidad: 120 mm/s

  2. rango: 130 x 85 mm

  3. resolución: 0,05 µm

Platina motorizada Z:
  1. paso: 10 nm
  2. rango: 12 mm
  3. cuatro velocidades: para el mando macrométrico y 2 para el micro

Características:

  • tecnología Electron Multiplying Back Thinned Transfer CCD
  • chip de 512x512 píxeles con un tamaño de 16x16 μm
  • velocidad de lectura de la imagen completa de70 fps
  • binning 1x1, 2x2 y 4x4
  • ganancia EM (electron multiplying) entre 1 y 1200x
  • Eficiencia cuántica (QY) > 90%
  • ganancia analógica entre 0,5x y 1x para modo EM y entre 1x y 5x para modo no EM
  • refrigeración por aire (-65ºC) y agua (-80ºC)
  • digitalización de 16 bits

 

  1. panel de control mediante pantalla táctil incorporada en el estativo

  2. lámpara de metal haluro de 120 W

 

Filtros para fluorescencia:

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Filtro de emisión

DAPI

ultravioleta

356

BP 455/50

GFP

azul

BP 470/40

BP 525/50

DsRed

verde

BP 530-585

LP 615

 

 
Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Técnica*

Inmersión

Plan-Apochromat

10x/0.45

BF,FLUO

 

Plan-Apochromat

25x/0.80

BF,DIC,FLUO

agua,glicerol,aceite

W N-Achroplan

40x/0.75

BF, FLUO

agua

Plan-Apochromat

40X/1.2

BF,DIC,FLUO

agua, glicerol, aceite

Plan-Apochromat

63x/1.4

BF,DIC,FLUO

aceite

 

*BF = campo claro, DIC = contraste diferencial interferencial, FLUO = Fluorescencia

 

Cámara CCD Axiocam 503 color
  1. pixels: 1936 x 1460
  2. tamaño de pixel: 4.54 μm x 4.54 μm
Módulo confocal

 

Láseres

  1. 405, 488, 458, 514, 561 and 633 nm

Detectores

  1. 3 PMTs espectrales
  2. Airyscan para superresolución
  3. 1 PMT para luz transmitida

Platina motorizada XY

  1. velocidad: 100 mm/s
  2. resolución: 0,1 µm
  3. reproducibilidad <1 µm

Platina motorizada Z

  1. rango: 500 μm
  2. velocidad: 5 mm/sec
  3. reproducibilidad: +/- 5 nm

Software

  1. ZEN black: adquisición de imágenes
  2. ZEN blue: image processing (3D, colocalización)


Luminómetro para realizar cribados de experimentos de inmunofluorescencia (simples o dobles marcados) con objeto de seleccionar muestras positivas con señal de fluorescencia para su posterior observación y análisis en el microscopio confocal.


Características técnicas:

 

  1. Fluorescencia y Luminiscencia.
  2. FRET, TR-FRET y BRET.
  3. Rango de longitud de excitación: 200-1000 nm
  4. Rango de longitud de emisión: 270-840 nm
  5. Microplacas de 6 a 384 pocillos.
  6. Agitación orbital.
  7. Control de temperatura de 4 a 45°C.

 

Microscopio invertido automático Leica DMI6000CS 

 

  1. panel de control táctil STP6000

  2. smart move: consola para mover la platina en XY y Z 

  3. fuente de luz de fluorescencia Leica EL6000, con lámpara de metal haluro de 120 

  4. Filtros para fluorescencia:

Bloque de filtros

Luz de excitación

Filtro de excitación

Espejo dicroico

Filtro de emisión

A4

ultravioleta

BP 360/40

400

BP 470/40

CFP

violeta/azul

BP 436/20

455

BP 480/40

GFP

azul

BP 470/40

500

BP 525/50

I3

azul

BP 450-490

510

LP 515

N2.1

verde

BP 515-560

580

LP 590

 

  • Objetivos:

Tipo

Aumento/apertura numérica

Técnica*

Inmersión

PL APO CS

10x/0.4

BF,FLUO

 

PL APO CS

20x/0.70

BF,FLUO

 

PL APO CS2

20X/0.75

BF,DIC,FLUO

agua, glicerol, aceite

PL APO CS2

40x/1.1

BF,DIC,FLUO

agua

PL APO CS2

63x/1.4

BF,DIC,FLUO

aceite

 

*BF = campo claro, DIC = contraste diferencial interferencial, FLUO = fluorescencia

 

Módulo confocal

 

Sistema de barrido FOV: 
  1. velocidad hasta 1.800 Hz (3.600 Hz en modo bidireccional)
  2. hasta 7 fps @ 512 x 512 píxeles
  3. formato de imagen hasta 8.192 x 8.192 píxeles
Láseres: 
  1. CW (405 nm). 50 mW
  2. Ar (458, 488 y 514 nm). 100 mW
  3. DPSS (561 nm). 20 mW
  4. He-Ne (633 nm). 10 mW
Detectores: 
  1. 4 espectrales para fluorescencia y reflexión (2 PMT y 2 HyD)
  2. 1 (no confocal) para luz transmitida
Divisor de haz LIAchroic que incluye los siguientes dicroicos: 
  1. substrate (405)
  2. 488/561/633
  3. 458/514/561
  4. 476/488
  5. RT 15/85 (reflexión)
  6. 488/561
Platina galvanométrica super Z: 
  1. paso mínimo 20 nm
  2. rango de recorrido 1500 µm
Platina motorizada de scanning XY: 
  1. velocidad: 10 mm/segundo
  2. resolución 0,02-0,04 µm
  3. reproducibilidad <1 µm

Software 

LAS X con tutorial para análisis de FRET & FRAP y visor 3D