Registro en tiempo real de la actividad transcripcional en ensayos de transactivacion en chopos

Usando una línea reportera estable, basada en el gen del reloj circadiano PtaLHY2, hemos desarrollado una metodología para investigar la regulación de la transcripción y transducción de señales de forma continua durante días. Con esta herramienta podemos evaluar, de forma rápida, la actividad de potenciales reguladores de los ritmos diurno y circadiano en chopo.

 

Los ensayos de transactivacion han sido aplicados en muchas especies vegetales con el fin de analizar la actividad de factores de transcripción a un tiempo concreto. El registro en tiempo real de la actividad transcripcional usando ensayos transitorios, abre nuevas perspectivas para el análisis de la regulación de la transcripción en plantas.

Nosotros hemos creado y validado en chopo una línea estable reportera estable basada en el gen del reloj circadiano PtaLHY2, la cual puede ser usada para investigar regulación de la transcripción y transducción de señales en chopo. Usando esta línea, hemos desarrollado una metodología para evaluar de forma rápida la actividad de potenciales reguladores de los ritmos diurno y circadiano. De esta forma hemos demostrado que la proteína remodeladora de la cromatina HMGB2/3, activa la transcripción de PtaLHY2 dentro su ventana temporal de actividad.

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Determinacion de la abundancia de las proteínas PtaHMGB2/3 y PtaHMGB6 seguido por el ensayo de transactivacion usando el reportero pPtaLHY2::LUC

 

Publicación Original:

Ramos-Sánchez, JM; Triozzi, PM; Moreno-Cortés, A; Conde, D; Perales, M; Allona, I. 2017. "Real-time monitoring of PtaHMGB activity in poplar transactivation assays". Plant Methods. DOI: 10.1186/s13007-017-0199-x".

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