NifB cataliza el primer paso exclusivo de la biosíntesis del cofactor de hierro y molibdeno de la nitrogenasa. Es también esencial para las biosíntesis de los cofactores de los sitios activos de las nitrogenasas de V y Fe y, por lo tanto, esencial para toda la actividad de fijación de nitrógeno en la Tierra. Debido a su extrema sensibilidad a oxígeno y su inherente inestabilidad, las proteínas NifB deben purificarse mediante métodos rápidos de cromatografía de afinidad en condiciones anaerobias estrictas. Este trabajo describe una variedad de estrategias utilizadas para superar estas dificultades estableciendo protocolos que reflejan el estado del arte en la purificación de una proteína paradigmática sensible al oxígeno.